Montag, 6. Oktober 2014

Polymerase-Chain-Reaction (PCR)

Replikation - PCR
Helicase - Hitze 95°C

DNA-Polymerase - taq-Polymerase (hitzebeständiger, aus Bakterien)
Ligase - /
Primase - /
Primer - Primer
Nucleotide - Nucleotide


Denaturierung: Die DNA wird auf 94°C erhitzt, sodass die Wasserstoffbrücken zwischen den Basen getrennt werden.
Hybridisierung: Die Temperatur wird auf ca. 50-70°C abgesenkt (je nach Primer). Die Primer heften sich an die Basen.
Polymerisierung: Bei einer Temperatur von 72°C synthetisiert die taq-Polymerase die DNA-Stränge und die PCR kann erneut beginnen.

Die taq-Polymerase ist erforderlich, da die normale Polymerase bei einer Temperatur von 94°C denaturiert werden würde.

Das Wachstum bei der PCR ist exponentiell, nach 30 Zyklen (Wiederholungen) liegen über 1.000.000 DNA-Stränge/Kopien vor.
Zudem ist es durch die PCR und die Primer möglich, ein gesuchtes DNA-Stück einzurahmen und nur dieses zu synthetisieren.

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